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大小鼠細菌真菌檢測方法培養(yǎng)法和PCR方法比較
發(fā)布時間: 2025-12-19 點擊次數(shù): 145次實驗動物的質(zhì)量管理對實驗動物生產(chǎn)、動物實驗項目的順利開展有著非常重要的意義,所以需要靈敏、快速、特異性高、性價比高的檢測方案,來實現(xiàn)動物病原微生物的檢測和篩查。2023年7月1日,新的國家標準GB 14922—2022 《實驗動物 微生物、寄生蟲學等級及監(jiān)測》正式實施,新國標對一些項目和內(nèi)容進行了調(diào)整,增加了選取哨兵動物作為檢測用動物。
大小鼠細菌真菌檢測方法——培養(yǎng)法
對于檢測方法新國標中指出:“按 GB/T 14926(所有部分)和 GB/T 18448(所有部分)的規(guī)定對第5章的所有指標要求逐項進行檢測"。其中GB/T 14926是對病毒、病原菌檢測方法的介紹,GB/T 18448是對寄生蟲檢測方法的介紹。病原菌檢測則多采用菌落形態(tài),菌體形態(tài),生化反應,血液凝集反應等檢測方法。GB/T 14926.1-2001 《實驗動物 沙門菌檢測方法》中描述了沙門菌的檢測,檢測原理是看菌落形態(tài),菌體形態(tài),生化反應,血液凝集反應等。沙門菌在培養(yǎng)基上有特定的生長、形態(tài)和生理生化特征;菌體抗原與相應抗體結合,產(chǎn)生凝集反應。GB/T 14926.17-2001《實驗動物 綠膿桿菌檢測方法》中描述了綠膿桿菌的檢測方案,觀察和測試菌落形態(tài),菌體形態(tài),氧化酶試驗,生化試驗。綠膿桿菌是革蘭陰性桿菌,具有產(chǎn)生綠色色素和氧化酶等生化試驗特征,可利用選擇性培養(yǎng)基培養(yǎng)、菌體檢驗和生化試驗進行鑒定,主要特點是綠色。
大小鼠細菌真菌檢測方法——PCR法
培養(yǎng)法是傳統(tǒng)的細菌真菌的檢測方法,目前也有一些其他的病原體檢測方法,如PCR檢測法,也就是PCR檢測結合電泳分析、熒光定量PCR檢測等。近幾年公布的一些地方標準和團體標準中就包含有核酸檢測的方法。如2025年7月中國獸醫(yī)協(xié)會CVMA 發(fā)布和實施了三項團體標準,其中一項是T/CVMA 274—2025 《實驗動物 鼠棒狀桿菌熒光PCR檢測方法》,文件規(guī)定了實驗動物鼠棒狀桿菌的熒光PCR檢測方法,適用于實驗大鼠、小鼠的鼠棒狀桿菌定性檢測。T/CALAS 20-2017 《實驗動物 牛棒狀桿菌檢測方法》,文件中牛棒狀桿菌檢測方法包括培養(yǎng)法和PCR法。
目前市面上提供的熒光定量PCR檢測試劑盒包括單重檢測和多重檢測兩種,相比較單重檢測來說,多重熒光定量PCR檢測方法的成本更低廉,更符合降本增效的原則。翼和生物采用多重熒光定量qPCR檢測方案,開發(fā)了多款針對SPF大鼠小鼠的病毒和病原菌檢測試劑盒,檢測的病原項目符合國標GB14922—2022中的病毒和細菌、真菌的檢測項目要求。翼和生物聯(lián)檢試劑盒中一個熒光通道可以同時檢測2-3種病原菌,但是不進行具體病原菌的鑒定,也就是說一旦這個熒光通道有信號陽性,那么這2-3種病原菌都有可能是陽性。國標病原菌必檢八項聯(lián)檢試劑盒、國標病原菌選檢七項聯(lián)檢試劑盒。病原菌鑒定試劑盒中一個熒光通道只鑒定一種病原菌,所以可以通過熒光通道直接判斷感染的具體病原菌。我們的鑒定試劑盒可以搭配聯(lián)檢試劑盒使用。我們還提供DNA/RNA核酸共提取試劑盒。實驗流程方便快捷,總體實驗過程大概4小時。
總之當前病原體的檢測越來規(guī)范,對試劑盒檢測效率、準確度和成本控制的要求越來越高。病原體有相當大的市場需求,伴隨著這些市場需求,檢測方法會越來越成熟,PCR的方法應用會越來越多。



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