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SPF級實驗動物大鼠小鼠病原檢測中的熒光定量PCR技術(shù)的應(yīng)用
發(fā)布時間： 2026-01-04 點擊次數(shù)： 123次近幾年來,PCR技術(shù)不斷發(fā)展,它以準(zhǔn)確、快速、便捷等優(yōu)點廣泛應(yīng)用在科學(xué)研究的各個領(lǐng)域。特別是熒光定量PCR技術(shù)，高靈敏、快速、特異性高等特點。實驗大鼠小鼠在基礎(chǔ)生命科學(xué)和藥物學(xué)方面的應(yīng)用極為廣泛，科學(xué)的發(fā)展和更新的研究目標(biāo)對實驗動物的質(zhì)量提出了越來越高的要求。國標(biāo)GB14922—2022中明確規(guī)定了大鼠小鼠病原微生物需要排除的項目。這些病原微生物會影響到實驗動物的健康或者實驗結(jié)果。方便快捷的檢測方式有助于提高檢測的準(zhǔn)確性和成功率。PCR技術(shù)越來越多的應(yīng)用于實驗動物病原微生物的檢測。
SPF級實驗動物根據(jù)國家標(biāo)準(zhǔn)GBGB 14922—2022中沙門氏菌、支原體、綠膿桿菌、肺炎克雷伯桿菌、嗜肺巴斯德桿菌等都是必檢的病原菌。細(xì)菌和真菌的檢測中,傳統(tǒng)的細(xì)菌學(xué)培養(yǎng)方法需要培養(yǎng)基培養(yǎng)，富集培養(yǎng)、形態(tài)特征觀察、生理生化反應(yīng)以及血清學(xué)鑒定等過程,操作復(fù)雜、耗時費力,對實驗人員的技術(shù)要求也很高。對于病毒來說，呼腸孤病毒Reo-3、仙臺病毒SV、小鼠肝炎病毒MHV、漢坦病毒HANT都是必須要排除的病毒。ELISA是病毒檢測的好方法，但是因為抗體產(chǎn)生相對滯后，并且對于免疫缺陷鼠無法產(chǎn)生抗體，所以需要更靈敏的檢測方案。目前,越來越多的研究者使用PCR技術(shù)檢測這些病原菌和病毒。
熒光定量PCR成為用于檢測病毒感染的常用的方法。不同的熒光標(biāo)記物也使得多重檢測成為可能，比如一個反應(yīng)體系內(nèi)可見檢測多重?zé)晒釬AM、HEX、ROX 熒光，每種熒光探針標(biāo)記1-3種病毒，從而可以實現(xiàn)一個孔中多種病毒的檢測。
四款聯(lián)檢試劑盒：國標(biāo)病毒必檢八項、國標(biāo)病毒選檢六項、國標(biāo)病原菌必檢八項、國標(biāo)病原菌選檢七項。聯(lián)檢試劑盒中一個熒光通道可以同時檢測 2-3 種病原體，但是不進(jìn)行具體病原的鑒定，也就是說一旦某個熒光通道有信號陽性，那么該熒光對應(yīng)的這 2-3 種病原體都有可能是陽性。
翼和生物還開發(fā)了十款鑒定試劑盒。鑒定試劑盒中一個熒光通道只鑒定一種病原，所以可以通過熒光信號直接判斷感染的具體病原體。
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