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仙臺(tái)病毒PCR檢測(cè)方法
發(fā)布時(shí)間： 2026-02-13 點(diǎn)擊次數(shù)： 38次仙臺(tái)病毒的PCR檢測(cè)方法
仙臺(tái)病毒的生物學(xué)特點(diǎn)
仙臺(tái)病毒(1953年在日本仙臺(tái)發(fā)現(xiàn)，命名為Fushimi株。仙臺(tái)病毒(Sendai virus)屬于副黏病毒科、呼吸道病毒屬病毒，是具有包膜的病毒，病毒核酸為單股負(fù)鏈RNA，基因組長(zhǎng)度15 384個(gè)核苷酸，基因組編碼6個(gè)結(jié)構(gòu)蛋白：核殼蛋白(N)，磷蛋白(P)，基質(zhì)蛋白(M)，融合蛋白(F)，血凝素·神經(jīng)氨酸酶(HN)和大蛋白(Large protein,L)，和一個(gè)非結(jié)構(gòu)蛋白C，其中L蛋白具有高度保守性。
仙臺(tái)病毒可引起嚙齒類動(dòng)物呼吸系統(tǒng)疾病，仙臺(tái)病毒傳染性強(qiáng)，在多數(shù)情況下呈隱性感染，改變體內(nèi)細(xì)胞免疫反應(yīng)，藥效學(xué)實(shí)驗(yàn)結(jié)果，干擾實(shí)驗(yàn)結(jié)果，且被仙臺(tái)病毒感染的動(dòng)物群很難凈化。仙臺(tái)病毒是國(guó)標(biāo)中大鼠小鼠等實(shí)驗(yàn)動(dòng)物的必檢項(xiàng)目，必須排除。為確保實(shí)驗(yàn)動(dòng)物質(zhì)量符合標(biāo)準(zhǔn)，建立一種快速準(zhǔn)確的檢測(cè)方法就顯得尤為重要。
仙臺(tái)病毒的傳統(tǒng)檢測(cè)方案
仙臺(tái)病毒的檢測(cè)利用抗原檢測(cè)仙臺(tái)病毒抗體（ELISA)，仙臺(tái)病毒SV可以凝集雞和豚鼠紅細(xì)胞(血液凝集反應(yīng))，凝集作用可以被仙臺(tái)病毒抗體抑制。
但ELISA存在檢測(cè)耗時(shí)較長(zhǎng)，包被抗原較難制備，需要免疫動(dòng)物制備陽(yáng)性血清等問(wèn)題，較為繁瑣。
仙臺(tái)病毒的PCR檢測(cè)方案
目前，針對(duì)仙臺(tái)病毒的新的分子生物學(xué)檢測(cè)方案是針對(duì)核酸RNA的檢測(cè)方案。如PCR和熒光定量PCR?；A(chǔ)都是檢測(cè)RNA病毒的核酸序列，且核酸出現(xiàn)擴(kuò)增和繁殖的時(shí)間比產(chǎn)生抗體的時(shí)間提前，方便早檢測(cè)、早篩查、早處理。
實(shí)時(shí)熒光定量PCR（qPCR)方法有靈敏度較高、直接檢測(cè)病毒核酸并可以對(duì)核酸濃度定量檢測(cè)等優(yōu)點(diǎn)。能夠快捷、準(zhǔn)確地檢測(cè)樣本中仙臺(tái)病毒的核酸含量。
翼和生物開(kāi)發(fā)的多種病毒鑒定試劑盒——Ⅲ型呼腸孤病毒Reo-3、仙臺(tái)病毒SV、小鼠肝炎病毒MHV多重qPCR鑒別試劑盒，包含仙臺(tái)病毒SV。試劑盒采用多套引物探針，在FAM（Ⅲ型呼腸孤病毒 Reo-3）， HEX（仙臺(tái)病毒SV），ROX（小鼠肝炎病毒 MHV）三個(gè)通道檢測(cè)3種病毒，另外一套引物探針在CY5通道檢測(cè)內(nèi)參RNA。該試劑盒具有以下特點(diǎn)：
靈敏：檢測(cè)靈敏度較高，10 copies/μL可被有效檢出。
穩(wěn)定：全程閉管操作，無(wú)交叉污染。
可靠：含內(nèi)參對(duì)照，避免假陰性。
方便：操作簡(jiǎn)單，一步法檢測(cè)。
對(duì)該方法的特異性、穩(wěn)定性、重復(fù)性、靈敏度進(jìn)行驗(yàn)證，效果明顯。
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